شرح مقاله

رتیکولوسیت ها
tools نحوه شمارش رتیکولوسیت ها
از آنجائیکه ریبوزوم ها دارای خاصیت رنگ پذیری با رنگ های ویژه ای همچون برلیانت کرزیل بلو (Briliant cresyl blue) و متیل بلوی جدید (New methyle blue) بوده و به شکل رسوبات دانه ای و یا رشته ای درون یاخته سرخ شکل می گیرند ، از رنگ های فوق جهت تعیین درصد ان ها استفاده می شود .چون ریبوزوم رتیکولوسیت ها تنها به صورت زنده و بدون مرگ و یا ثابت شدن سلول (فیکساسیون) با این رنگ ها ،رنگ پذیرفته و تشخیص داده می شود به انها رنگ های حیاتی گویند .تعداد ریبوزوم ها و در نتیجه شدت رنگ پذیری عمدتا در رتیکولوسیت های نارس تر شدت بیشتری داشته و هر چه سلول بالغتر شود از تعداد ریبوزوم ها و در نتیجه شدت رنگ پذیری ان کاسته می شود .قضاوت و تصمیم اینکه چه چیزی رتیکولوسیت است در زیر میکروسکوپ کمی مشکل است چرا که اغلب رتیکولوسیت های بالغ حاوی تعداد بسیار اندکی ریبوزوم های رشته ای و یا نقطه ای هستند .بنابر تجربه پاره ای از محققین رنگ متیلن بلوی جدید ارجح تر از بریلیانت کرزیل بلو بوده و ریبوزوم ها را با شدت و یکنواختی بیشتری رنگ می نماید .به نظر می رسد آزور B  خالص ، جانشین مناسبی برای متیلن بلو جدید باشد چرا که فاقد رسوب بوده ، غلظت رنگ مصرفی و مراحل رنگ پذیری هر دو رنگ یکسان است .2 الی 3 قطره رنگ متیلن بلو را با پیپت پاستور داخل لوله شیشه ای یا پلاستیکی ریخته و 2 تا 4 برابر حجم رنگ به ان خون حاوی ضد انعقاد اضافه و سپس انها را مخلوط کرده و لوله را در دمای 37 درجه به مدت 15 الی 20 دقیقه نگهداری کنید .با تکان دادن ارام لوله گلبول های قرمز را مجددا به حالت سوسپانسیون در اورده و با روش متداول گسترش هایی روی لام تهیه کنید و بعد از خشک شدن ، بدون ثابت کردن و رنگ امیزی دیگری زیر میکروسکوپ ببینید .
  چهارم آذر ١٤٠١ ساعت ٢١:٤٠ نظرات[0]
 
از انجائیکه حجم دقیق خون که به محلول رنگ اضافه گشته شمارش یاخته های سرخ را تحت تاثیر قرار می دهد .مقدار زیادتری از خون آنمیک و مقدار کمتری از خون را در موارد پلی سیتمی نسبت به خون نرمال باید به محلول رنگی اضافه نمود .در یک لام خوب تهیه شده ،ریبوزوم رتیکولوسیت ها به رنگ ابی درآمده و سلول های بالغ به صورت سایه های کم رنگ آبی مایل به سبز ،به صورت پراکنده رنگ می گیرد .شمارش رتیکولوسیت ها حداکثر تا 24 ساعت بعد از گرفتن نمونه قابل قبول است ولی عمدتا باید دانست که با گذشت زمان و ماندن در حرارت آزمایشگاه با بلوغ رتیکولوسیت ها و تبدیل شدن انها به یاخته های سرخ بالغ ، درصد رتیکولوسیت ها کاهش یافته و در خون فرد نرمال بعد از 24 ساعت به صفر می رسد .تعداد گلبول های سرخ که مورد ارزیابی قرار می گیرد و رابطه غیر مستقیمی با تعداد رتیکولوسیت ها دارد فی المثل اگر تعداد رتیکولوسیت های بیمار اندک بود باید تعداد بیشتری از گلبول ها را مورد بررسی قرار داد .برای درصد های کمتر از 10 باید بررسی میدان های مختلف حداقل 100 رتیکولوسیت را مشاهده و سپس با بستن تناسب مشخص سازیم که به ازاء درصد یاخته سرخ ، چه تعداد رتیکولوسیت مشاهده شده است هر چند در موارد شدید رتیکولوسیت (Reticulocytopenia severe)این طریق شمارش بسیار وقت گیر است ولی حداقل استفاده از یک شمارشگر دستی می تواند ازمایش کننده را تا حد زیادی کمک نماید .در مواردی که درصد رتیکولوسیت ها بیشتر از 10 است تعداد یاخته های سرخ موجود چه رتیکولوسیت و چه اریتروسیت بالغ در تعداد بیشتری از میادین باید مورد ارزیابی قرار بگیرد .درصد نرمال رتیکولوسیت در بالغین 0.2 تا 2 درصد و در نوزادان تازه به دنیا آمده و یا خون بند ناف 2 الی 6 درصد است .رتیکولوسیت هایی که به صورت نارس از مغز استخوان به خون محیطی وارد می شوند ، به عنوان رتیکولوسیت های تحت استرس (shift Reticulocyte) شناخته می شوند .رتیکولوسیت های تحت استرس به جای اینکه در مدت 1 روز در خون محیطی رشته های خود را از دست بدهند این کاررا در مدت 2 الی 4 روز انجام می دهند زیرا که زودتر از موعد وارد خون شده اند .چناچه در لام خون محیطی بیمار سلول های پلی کرومازی یا گلبول قرمز هسته دار در پاسخ به کم خونی شدید یافت شود بایستی برای ارزیابی فعالیت روزانه مغز استخوان فرد بیمار نسبت به شخص سالم ، از اندکس   RPIاستفاده شود .هنگامی که رتیکولوسیت بسیار نارس (آکنده از رشته های ریبوزوم و ریبونوکلوئیک اسید) بر اثر تحریک هورمونی از مغز استخوان وارد خون محیطی می شود ، نسبت به حالت نرمال به زمان زیادتری برای بالغ شدن نیاز دارد .زمان بلوغ برای فردی با هماتوکریت 45% یک روز است و هر 10 درصد که از میزان هماتوکریت کم شود نصف روز به زمان بلوغ (maturation time) اضافه می شود .

15>
24_15
34_25
39_35
45_40
HCT
3
2.5
2
1.5
1
maturation time




كليه حقوق اين اثر متعلق بهhttps://www.razineekazma.irميباشد.
هرگونه تقليد و نقل مطالب بدون ذكر منبع ممنوع می باشد.

location
رشت چهار راه میکائیل خیابان امام خیابان حسام پلاک 94
mail
info@razineekazma.ir